皮肌炎患者b淋巴细胞分泌免疫球蛋白的检测医学论文,皮肌炎/多发性肌炎外周血白细胞EB病毒检测
(一)病例:dm和pm共40例,男8例,女32例;年龄18～65岁,平均39.61±12.86岁
(三)方法:
(收稿:1997-12-01 修回:1998-03-16)
[3] 李文全, 畅继武. 皮肌炎患者b淋巴细胞分泌免疫球蛋白的检测.中华皮肤科杂志, 1994,27:364-365.
1.标本处理:肝素抗凝血200μl,加1ml 0.83% nh4cl,37℃水浴20min,8000r/min3min离心,弃上清液及压积于白细胞表面的红细胞碎片,并尽量吸去在得到的白细胞中加入40μl裂解液和2μl(10mg/ml)蛋白酶k,搅匀后45℃水浴1h,稍加离心,100℃水浴5min,10000r/min 2min离心,取上清液待检其中dm18例,pm 22例均符合bohan等[2]的诊断标准,且均无并发恶性肿瘤正常对照组选自健康志愿者40例,年龄和性别与患者组匹配
中华皮肤科杂志 1999年第1期第32卷 短篇论著
皮肌炎/多发性肌炎外周血白细胞eb病毒检测
参 考 文 献
3.电泳与结果判定:取15μl反应液,2%琼脂糖凝胶电泳(5v/cm)30min后,紫外灯下观察结果若在154bp处出现橙黄色条带,则为eb病毒阳性
2.加样及pcr扩增:加eb病毒-pcr反应液20μl、taq酶1μl(1u/μl)、阳性模板/待检样本3μl,混匀后稍加离心,滴2滴消毒液体石蜡油,置94℃预变性2min,再94℃30s、55℃ 30s、72℃ 60s扩增35个循环
已知eb病毒感染与类风湿性关节炎和sle等自身免疫病的发生有关[1]为探讨eb病毒与皮肌炎(dm)/多发性肌炎(pm)的关系,我们应用pcr技术对dm/pm患者外周血白细胞中的eb病毒进行了检测,现报道如下
(二)试剂:采用上海复生生物工程研究所生产的pcr检测eb病毒试剂盒,成分:eb病毒-pcr反应液(含4种脱氧核苷三磷酸及标准pcr缓冲液),taq酶(1μl/μl),eb病毒-dna裂解液,eb病毒阳性模板
[1] petersen j, rhodes g, roudier j, et al. altered immune response to glycinerich sequences of epstein-barr nuclear antigen-1 in patients with rheumatoid arthritis and systemic lupus erythematosus. arthritis rheum, 1990, 33: 993-1000.
一、资料和方法
三、讨论
作者:张士发 林俊萍 王雅坤 张欣 梁再赋 顾绍裘
[2] bohan a, peter jb. polymyositis and dermatomyositis. n engl j med,1975,292:403-407.
4.统计分析:χ2检验
dm/pm是一种自身免疫性疾病,其外周血中存在多种自身抗体,如抗jo-1抗体等研究表明,eb病毒在体外与dm外周血b淋巴细胞作用后,b淋巴细胞在短时间内即可合成和分泌大量的抗体,包括抗核抗体等[3]本研究表明,dm和pm的eb病毒感染率显著高于正常对照组,表明eb病毒感染可能与dm/pm中b淋巴细胞活化、增殖、转化和自身抗体产生有关,即可能是dm/pm的发病诱因另外,也不排除由于dm/pm自身免疫功能紊乱,从而有利于eb病毒感染或携带,导致eb病毒高感染率目前尚无定论,有待进一步研究
单位:张士发( 沈阳,沈阳军区总医院皮肤科);林俊萍 王雅坤 张欣 梁再赋 顾绍裘(中国医科大学附属第一临床学院皮肤科)
二、结果
40例dm/pm中eb病毒阳性者16例,阳性率为40%;18例dm中eb病毒阳性者8例,阳性率为44%;22例pm中eb病毒阳性者8例,阳性率为36%40例对照组中eb病毒阳性者3例,阳性率7.5%统计分析表明,dm/pm与对照组比较,χ2=11.66,p<0.01;dm与pm比较,χ2=0.27,p >0.05;dm与对照组比较,χ2=11.02,p<0.01;pm与对照组比较,χ2=8.10,p< 0.01
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